1. Ammonium Chloride Solution（氯化铵红细胞裂解液）：氯化铵溶液（NH4Cl溶液）中铵根不能透过细胞膜，除铵根离子以外的其它离子均能够透过细胞膜进入细胞内，导致细胞内的离子浓度高于细胞外，造成细胞膜内外的渗透压差，细胞外的水进入细胞内部，造成细胞膨胀。又因为红细胞的结构简单，只有细胞膜，对于膨胀的耐受能力较差，因此大部分红细胞会涨破而被裂解。红细胞裂解液不能100% 准确的裂解红细胞，总会或多或少对其他种类细胞有所影响。因此裂解时间不宜超过15分钟，一般以10分钟为宜，否则会对细胞活性有较大的伤害，同时产生大量细胞碎片，对下游实验造成不利影响。
Ammonium Chloride Solution（货号#07850）
实验步骤和注意事项：
A. 将存储于-20℃的氯化铵（NH4Cl）溶液于2-8℃过夜融化，切勿在室温或加热融化，以免氯化铵挥发或分解；
注：如果不立即使用，融化后的氯化铵溶液2-8℃下最多存放2周。
B. 在要处理的样本中添加适量的氯化铵溶液。氯化铵与样本体积比（人骨髓4：1；人外周血或脐血9：1；小鼠骨髓、脾或外周血9：1）；
C. 轻柔地上下翻转试管使裂解液与样本充分混合，然后将其置于冰上，孵育10分钟；孵育期间温和涡旋震荡或翻转一次或两次。检查是否已完全裂解（混合物呈现半透明的酒红色）。如果没有完全裂解，在冰上再孵育5 - 10 分钟，期间温和涡旋震荡或翻转；
D. 加入PBS缓冲液中止裂解，通过离心清洗细胞。并重复清洗一遍。
注：裂解全血或脐带血时，如果裂解1次并离心得到细胞后，细胞沉淀中红细胞仍残留很多，可重复此裂解过程1~2次，（总共不超过3次）。但不要单次裂解细胞超过15分钟，否则会损伤细胞活性。
2.EasySep RBC Lysis Buffer/红细胞裂解液: 该裂解液的原理与氯化铵裂解原理相同。氯化铵能完全裂解所有的红细胞，但裂解时间不宜太长，否则会造成细胞死亡。该裂解液虽不能完全裂解红细胞，但裂解的时间可相对延长，同时细胞活性不受影响。由于该裂解液是作为Easysep免疫磁珠细胞全血正选细胞试剂盒的配套试剂，因此红细胞去除不完全并不影响实验结果。该红细胞裂解液不能与氯化铵换用，尤其对于全血中红细胞的去除。该裂解液对细胞作用温和，且裂解细胞后无需清洗细胞，缺点是不能100%裂解红细胞。
EasySep RBC Lysis Buffer（货号#20110）
实验步骤和注意事项：
Easysep™红细胞裂解液为10倍浓缩。1x RBC裂解缓冲液应在使用前至少1小时前准备。
A. 添加1份儿Easysep™红细胞裂解液于9份蒸馏水或Type 1水中，制备成1x RBC裂解缓冲液；
B. 使用前轻轻摇晃红细胞，完全混匀；
C．用肝素化的血液采集管采集全血。在14毫升的聚苯乙烯管中加入4.5毫升最大体积的全血（样本必须放在一个能与Stemcell Technologies）的”The Big Easy" 磁极相兼容的14 mL的管中）
注：推荐使用Falcon 14聚苯乙烯圆底管（corning#352057）。
D. 在样本中，按1：1的比例加入加入1x RBC裂解缓冲液，混匀；
E. 细胞使用前，用合适的培养基洗2次；对于Easysep™免疫磁珠细胞分选，可根据相关Easysep™全血分选细胞试剂盒加入相应试剂，立即进行细胞标记和分离。
注意：EasySep RBC Lysis Buffer（货号#20110）仅限于与EasySep免疫磁珠全血分选试剂盒配合使用，不能作为传统的红细胞裂解液对全血中的红细胞进行去除。
3．6%羟乙基淀粉溶液: 利用红细胞沉降法去除红细胞。红细胞表面呈“凹”形，羟乙基淀粉溶液可使红细胞在负电荷作用下彼此摞列成“钱串状”聚集体，从而增大了红细胞的沉降速率。同时有核细胞的下沉速率相对较低。于是大部分红细胞沉降至底部，有核细胞留在上清液里。这种方法相比氯化铵溶液裂解红细胞法更加温和，对细胞刺激和损伤较小，红细胞去除率达97%，同时保持了其它各类有核细胞组份的完整性。适合用于需要保留粒细胞的红细胞去除。
Hetasep（用于去除红细胞的6%羟乙基淀粉溶液）（货号#07806）
沉降红细胞实验步骤和注意事项：
重力沉降是一种简单且可靠的红细胞去除方法。通过HetaSep™溶液使RBCs 沉降，RBC 部分和去除RBC 的部分（富含有核细胞）之间会形成明确的分界面。小心取出富含有核细胞的部分，可以去除约99%的RBC。
A. 将1 份HetaSep™溶液加入5 份血液中，混合均匀；
B. 使样本沉降，直到RBC 界面处于约在总体积50%的位置；
注意：一个装满的15 mL 或50 mL 离心管需要约45 分钟完成沉降。半满的离心管需要约25 分钟。放置时间较长的样本需要将沉降的时间延长30%。
C. 收集含有核细胞的上清液，并用适当的培养基清洗一次；
D. 用氯化铵溶液裂解剩余的红细胞（可选步骤）。
4.. 密度梯度离心法（density gradient centrifugation）：当检测细胞在单个核细胞群中，如淋巴细胞、单核细胞、造血干细胞等，首先要将样本中的红细胞和粒细胞去除，目前常用Lymphoprep或Ficoll等密度梯度离心液通过密度梯度离心法直接分离和纯化外周血单个核细胞（PBMC）。
(一)原理:
常用来分离人外周血单个核细胞（PBMC）的分层液比重是 1.077±0.001 的 聚蔗糖(Ficoll)-泛影葡胺(Urografin)(F/H)分层液。Ficoll是蔗糖的多聚体，呈中性红细胞，犌W水性高，平均分子量为400,000，当密度为1.2g/ml仍未超出正常生理性渗透压，也不穿过生物膜。红细胞、粒细胞比重大，离心后沉于管底；淋巴细胞和单核细胞的比重小于或等于分层液比重，离心后漂浮于分层液的液面上，也可有少部分细胞悬浮在分层液中。吸取分层液液面的细胞，就可从外周血中分离到单个核细胞。
(二)实验步骤和注意事项：
A. 在短、中管中加入适量淋巴细胞分离液；
B. 取肝素抗凝静脉血与等量的PBS缓冲液、Hank's液或RPMI1640充分混匀，用滴管沿管壁缓慢叠加于分离液面上，注意保持清楚的界面。水平离心800×g，20分钟。离心时将离心机的升降速调慢；
C. 离心后管内分为三层，上层为血浆和缓冲液，下层主要为红细胞和粒细胞。中层为淋巴细胞分离液，在上、中层界面处有一以单个核细胞为主的白色云雾层狭窄带（单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞）。此外，所取得的细胞中还含有一定量的血小板；
D. 用毛细血管插到云雾层，吸取单个核细胞。置入另一短中管中，加入5倍以上体积的缓冲液，1500rpm×10分钟，洗涤细胞两次。
E. 末次离心后，弃上清，加入适用的缓冲液重悬细胞。
